Биовейвер в ЕАЭС по правилам Решения №85. Как избежать дорогих исследований биоэквивалентности
Исследование биоэквивалентности (БЭ) in vivo стоит дорого. Полноценное исследование на здоровых добровольцах в России стартует с нескольких миллионов рублей, без учёта аренды клинической базы, аналитических работ и мониторинга. Добавьте 6-9 месяцев от разработки протокола до финального отчёта, и регистрация воспроизведённого препарата превращается в отдельный проект с отдельным бюджетом.
Но для части препаратов такое исследование попросту не нужно. Если субстанция хорошо растворяется и хорошо всасывается в кишечнике, таблетка ведёт себя в организме так же, как оригинал, независимо от производителя. При условии, что её правильно сделали и она правильно растворяется в нужных условиях. Именно под эту логику создана процедура биовейвера: заменить клиническое исследование лабораторным тестом растворения.
В ЕАЭС биовейвер работает на основании Решения Совета ЕЭК от 03.11.2016 №85 (в редакции от 12.04.2024), конкретно Приложения №4. В рамках упрощённого порядка регистрации по Постановлению Правительства РФ №593 процедура прямо разрешена для воспроизведённых твёрдых пероральных форм немедленного высвобождения. Внешне всё просто: если ваш препарат и референтный одинаково быстро растворяются в трёх стандартных средах, они признаются биоэквивалентными. Никаких добровольцев, только лаборатория и правильно построенное досье.
На практике каждая часть этой формулы требует отдельной работы.
Что такое БКС и почему её принципы работают
Биофармацевтическая классификационная система (БКС) разделяет действующие вещества на основании двух параметров: растворимости в воде и кишечной проницаемости. Именно они определяют, что происходит с таблеткой после того, как её проглотили. Всё остальное вторично.
Отсюда четыре класса.
Класс I: высокая растворимость, высокая проницаемость. Единственный лимитирующий шаг — время опорожнения желудка. Если таблетка растворилась, пока ещё находилась в желудке, фармакокинетика совпадёт с оригиналом. Лучшие кандидаты для биовейвера. К этому классу принято относить метопролол, верапамил, флуоксетин (классификация основана на опубликованных клинических данных, Решение №85 перечень веществ не нормирует).
Класс II: низкая растворимость, высокая проницаемость. Вещество всасывается хорошо, но сначала должно раствориться, и этот процесс медленный, зависящий от состава препарата. Два разных состава дадут разные фармакокинетические профили. Биовейвер здесь невозможен. К этому классу принято относить итраконазол, карведилол, фенитоин.
Класс III: высокая растворимость, низкая проницаемость. Вещество растворяется быстро, но проникает через кишечный барьер с трудом. Состав вспомогательных веществ способен влиять на всасывание через моторику кишечника или активность транспортных белков. Биовейвер возможен, но требования значительно жёстче. К этому классу принято относить ацикловир, метформин, циметидин.
Класс IV: низкая растворимость, низкая проницаемость. Всасывание непредсказуемо, биовейвер исключён.
| Класс | Растворимость | Проницаемость | Биовейвер | Требование к растворению |
|---|---|---|---|---|
| I | Высокая | Высокая | Допустим | 85% за 30 мин (быстрое) или 15 мин (очень быстрое) |
| II | Низкая | Высокая | Недопустим | — |
| III | Высокая | Низкая | Допустим | 85% строго за 15 мин |
| IV | Низкая | Низкая | Недопустим | — |
Классификация субстанции по БКС — научный вывод, который нужно доказать экспериментально. Сослаться на справочник и написать «субстанция I класса» не получится. Эксперт запросит собственные данные лаборатории.
Как доказать растворимость и проницаемость
Растворимость
По Правилам ЕАЭС (п. 8 Приложения №4 к Решению №85) субстанция считается «хорошо растворимой», если максимальная разовая терапевтическая доза полностью растворяется в 250 мл водной среды при 37 ± 1°C в диапазоне pH 1,2-6,8. Объём 250 мл взят из клинической практики, именно столько воды принимают при фармакокинетических исследованиях.
Испытание проводят минимум в трёх средах:
- 0,1 М раствор соляной кислоты pH 1,2 (желудочная среда);
- ацетатный буфер pH 4,5 (промежуточная среда);
- фосфатный буфер pH 6,8 (зона основного всасывания).
Если у субстанции есть значение pKa в диапазоне 1,2-6,8, дополнительно изучают растворимость при pH, соответствующем минимальной растворимости. Минимум три повторных определения для каждого pH. Используют стандартный «shake-flask» или потенциометрическое титрование при условии его валидации.
Два ограничения, которые часто упускают. Первое: экспертиза ЕЭК не принимает данные из опубликованных статей, нужны собственные лабораторные данные для конкретной максимальной дозировки. Второе: если субстанция деградирует в ходе теста более чем на 10%, то правильно определить растворимость и класс по БКС в таких условиях невозможно (п. 15 Приложения №4).
Проницаемость
Проницаемость признаётся высокой, если вещество всасывается на 85% и более. По правилам ЕАЭС (п. 16 Приложения №4) оценка должна предпочтительно основываться на данных фармакокинетических исследований у человека.
Приоритетные источники доказательств:
- абсолютная биодоступность при внутривенном введении (наиболее убедительно);
- исследования материального баланса, если суммарная экскреция исходного вещества и его окисленных и конъюгированных метаболитов с мочой и желчью (фекалиями) превышает 85% (п. 17 Приложения №4);
- опубликованные клинические фармакокинетические данные.
Данные на клетках Caco-2 принимаются при строгой валидации системы (Приложение №1 к Требованиям Приложения №4). Лаборатория должна подтвердить работоспособность на достаточном количестве модельных веществ с нулевой, плохой, умеренной и хорошей проницаемостью. Принципиальное ограничение: клетки Caco-2 подходят только для доказательства пассивной диффузии. Для веществ-субстратов эффлюксных транспортёров (P-гликопротеин) данные in vitro могут давать ложно-оптимистичную картину, и тогда данные in vivo становятся обязательными.
Тест сравнительной кинетики растворения
СКТР проводят как центральный эксперимент биовейвера. Его задача: доказать, что тестовый препарат растворяется так же быстро, как референтный, в контролируемых условиях in vitro.
Параметры по Правилам ЕАЭС (п. 39 Приложения №4):
- не менее 12 единиц каждого препарата (тестового и референтного);
- прибор 2 (лопастная мешалка) при 50 об/мин или прибор 1 (вращающаяся корзинка) при 100 об/мин;
- температура среды 37,0 ± 1,0°C;
- объём среды 900 мл или меньше;
- три буферные среды: pH 1,2; 4,5 и 6,8;
- ПАВ в среду не добавляют.
Если при работе с лопастной мешалкой на скорости 50 об/мин наблюдается конусообразование (coning), допускается перейти на корзинку или использовать другие обоснованные подходы (грузила-синкеры). Все принятые решения документируют в протоколе. Временные точки должны обеспечивать полноценный профиль растворения; для быстрорастворяющихся форм рекомендуются отборы каждые 5-10 минут. Все индивидуальные значения по каждой единице сохраняются и входят в досье, не только средние.
Путь первый — «очень быстрое растворение»
Если оба препарата отдают 85% субстанции за 15 минут во всех трёх средах, профили считаются подобными без дополнительного расчёта (п. 43 Приложения №4). Для III класса такой результат обязателен.
Путь второй — фактор f2
Если растворение занимает от 15 до 30 минут (применимо только для I класса), подобие оценивают через фактор f2. Значение от 50 до 100 означает подобие профилей.
Условия для корректного расчёта f2 (п. 42 Приложения №4):
- оценка минимум в трёх временных точках (не считая нулевой);
- одинаковые точки отбора проб для обоих препаратов;
- в расчёт включается не более одной точки после того, как у обоих препаратов среднее растворение превысило 85%;
- коэффициент вариации (CV) не должен превышать 20% в ранние временные точки (до 10 минут) и 10% в остальные.
Специальный случай: если один препарат демонстрирует «быстрое растворение» (85% за 30 мин), тогда как другой показывает «очень быстрое» (85% за 15 мин), подобие всё равно нужно подтверждать расчётом f2 (п. 44 Приложения №4).
Если CV превышает эти пороги, расчёт f2 по средним значениям признаётся «неправильным» и сделать вывод о подобии профилей на его основе невозможно (п. 43). В таких случаях применяются альтернативные статистически корректные методы при наличии обоснования, например расчёт фактора различия f1, функция Вейбулла или попарное сравнение степени растворения (Приложение №5 к Решению №85, п. 11).
| Ситуация | Что требуется | Применимость |
|---|---|---|
| Оба препарата: 85% за ≤15 мин | f2 не нужен | I и III класс |
| Оба или один: 85% за 15-30 мин | f2 ≥ 50 | Только I класс |
| CV выше порога | Альтернативные статистические методы | По обоснованию |
| Растворение >30 мин | Биовейвер невозможен | — |
Состав вспомогательных веществ
Состав эксципиентов становится вторым по частоте источником проблем при экспертизе, уступая только вопросам классификации БКС.
Для I класса (п. 33 Приложения №4) допустимы качественные и количественные различия в составе, за исключением вспомогательных веществ, способных влиять на абсорбцию. Такие вещества должны совпадать качественно и различаться количественно не более чем на ±10% от содержания в референтном препарате. Суммарная разница по всем «влияющим» эксципиентам тоже не более ±10%.
Для III класса (п. 34, Приложение №4 с таблицей) требования значительно жёстче. Все вспомогательные вещества должны быть качественно одинаковыми. Количественные отклонения строго ограничены:
| Вид вспомогательного вещества | Допуск |
|---|---|
| Вещества, влияющие на абсорбцию (каждое) | ±10% от массы в референтном препарате |
| Все «влияющие» вещества суммарно | ±10% |
| Наполнитель | ±10% от массы ядра |
| Дезинтегрант (крахмал) | ±6% от массы ядра |
| Дезинтегрант (иной) | ±2% от массы ядра |
| Связующее | ±1% от массы ядра |
| Лубрикант (стеараты) | ±0,5% от массы ядра |
| Лубрикант (другой) | ±2% от массы ядра |
| Скользящее (тальк) | ±2% от массы ядра |
| Скользящее (иное) | ±0,2% от массы ядра |
| Все вспомогательные вещества суммарно | ±10% от массы ядра |
Особого внимания среди «влияющих на абсорбцию» заслуживают спиртосахара (маннитол, сорбитол) и поверхностно-активные вещества (натрия лаурилсульфат). Если вводится эксципиент, которого нет в референтном препарате, нужно письменно обосновать отсутствие его влияния на фармакокинетику. Без такого обоснования эксперт, как правило, запрашивает исследование in vivo.
Выбор референтного препарата
Правила ЕАЭС устанавливают чёткую иерархию (п. 18 Правил к Решению №85). В первую очередь используют оригинальный препарат, безопасность и эффективность которого подтверждены при регистрации в Союзе. Если его нет в обращении, берут оригинальный препарат из стран ICH. Далее идут препараты, одобренные Экспертным комитетом, и препараты с историей применения не менее 20 лет в одном из государств-членов.
Если референтный препарат закупается на рынках США или ЕС, нужно подтвердить, что это тот же продукт, что и на рынке ЕАЭС. Хорошая практика: перед закупкой изучить сертификаты анализа и сравнить с характеристиками, описанными в регистрационном досье ЕАЭС. При любых сомнениях в идентичности лучше провести собственный сравнительный анализ серий.
Ещё одно требование: содержание действующего вещества в исследуемой серии не должно отличаться от серии референтного препарата более чем на 5% (п. 20). Заявитель обязан обосновать выбор конкретной серии через СКТР и количественное определение.
Когда биовейвер невозможен
Несколько категорий препаратов полностью исключены из процедуры (п. 5 Приложения №4).
Препараты с узким терапевтическим индексом (NTI, Narrow Therapeutic Index). Дигоксин, варфарин, циклоспорин, фенитоин, литий, теофиллин. У этих препаратов небольшие колебания биодоступности приводят к токсичности или потере эффекта. Биоэквивалентность подтверждают только in vivo с зауженным доверительным интервалом 90,00-111,11% для AUC и Cmax (п. 104 Правил). Биовейвер не применяется, даже если субстанция формально относится к I или III классу БКС.
Комбинированные препараты с фиксированными дозами. Если в составе есть хотя бы один компонент II или IV класса, биовейвер для всего препарата недоступен. Когда все компоненты I или III класса, СКТР проводят по каждому действующему веществу отдельно, а требования к составу определяются более жёстким III классом, если он присутствует (п. 36 Приложения №4).
Препараты с буккальной или сублингвальной абсорбцией. Биовейвер на основе БКС применяется только при пероральном приёме препарата с запиванием водой. Если препарат допускается принимать без воды (например, диспергируемые во рту таблетки), необходимо отдельное исследование биоэквивалентности при приёме без воды (п. 24 Приложения №4).
Препараты с модифицированным высвобождением. Приложение №4 распространяется только на твёрдые формы и суспензии немедленного высвобождения.
Разные химические производные субстанции. Если тестовый и референтный препараты содержат разные соли одной субстанции, биовейвер допустим при условии, что обе соли относятся к I классу БКС (п. 7). Иные производные (эфиры, изомеры, комплексы) из процедуры исключены.
Что делать
Классифицируйте субстанцию до разработки состава. Закажите собственное исследование растворимости в трёх средах при 37 ± 1°C. Если у субстанции есть pKa в диапазоне 1,2-6,8, добавьте точку рядом с ним. Параллельно соберите клинические данные по абсорбции: публикации, паспорт субстанции, данные производителя АФС (активной фармацевтической субстанции). Если данных нет, планируйте тест на Caco-2 с полной валидацией по трём уровням проницаемости.
Проверьте ограничения до начала работы. Уточните, нет ли субстанции в списке NTI-препаратов (препараты с узким терапевтическим индексом, Narrow Therapeutic Index)., что форма относится к немедленному высвобождению, а препарат не предназначен для приёма без запивания водой. Если в составе несколько активных веществ, проверьте каждое по БКС. Этот шаг занимает несколько часов и способен сэкономить месяцы.
Разрабатывайте состав с прицелом на III класс. Даже если субстанция I класса, избегайте в составе больших количеств ПАВ и спиртосахаров. Это снизит риски при экспертизе и сохранит запас прочности при будущих изменениях состава.
Проводите СКТР строго по протоколу. Три среды, минимум 12 единиц, температура 37,0 ± 1,0°C, без ПАВ. Включайте ранние точки отбора не реже чем каждые 5-10 минут. Сохраняйте индивидуальные значения по каждой единице. Предварительно проверьте фильтры на отсутствие сорбции субстанции. Если в ранних точках CV превышает 20%, разберитесь с причиной до расчёта f2.
Оцените подобие профилей. Если оба препарата дали 85% за 15 минут во всех средах, дополнительного расчёта не нужно. Если один из препаратов показывает «быстрое», а другой «очень быстрое» растворение, считайте f2. При высоком CV f2 становится некорректным, и тогда нужны альтернативные методы со статистическим обоснованием.
Напишите обоснование биовейвера. По Правилам ЕАЭС (ПП №593, п. 6) в досье требуются письменное обоснование выбора биовейвера и аналитический отчёт по СКТР с индивидуальными данными. Хорошее обоснование включает вывод по классу БКС с экспериментальными данными, сравнительную таблицу состава с референтным препаратом и оценку эксципиентов. На практике от качества обоснования напрямую зависит, получит ли эксперт ответы на свои вопросы до официального запроса или только после него.
Биовейвер не сокращает объём работы — он переносит её из клиники в лабораторию. Зато убирает из регистрационного проекта самую дорогую и длительную часть. Для большинства воспроизведённых препаратов с субстанцией I или III класса процедура вполне достижима, если каждый шаг сделан по правилам и задокументирован должным образом. Обратиться с вопросами по применению правил можно к Экспертному комитету по лекарственным средствам, и такая возможность прямо предусмотрена пунктом 10 Правил к Решению №85.
Нормативная база:
1. Решение Совета ЕЭК от 03.11.2016 №85 «Об утверждении Правил проведения исследований биоэквивалентности лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономического союза» (в ред. решений Совета ЕЭК от 04.09.2020 №67, от 15.02.2023 №22, от 12.04.2024 №30). Приложение №4 — требования к биовейверу, основанному на БКС. Приложение №5 — тест сравнительной кинетики растворения.
2. Постановление Правительства РФ от 05.04.2022 №593 «Об особенностях обращения лекарственных средств…» (ред. действующая), п. 6 — допустимость биовейвера при упрощённой регистрации воспроизведённых лекарственных препаратов.
3. Федеральный закон от 12.04.2010 №61-ФЗ «Об обращении лекарственных средств» (ред. действующая), ст. 2 — определения биоэквивалентности и воспроизведённого лекарственного препарата.
4. ICH M9 «Biopharmaceutics Classification System-Based Biowaivers» (2019) — международное руководство, принципы которого совместимы с требованиями ЕАЭС.